中性蛋白酶II/DISPASE II

貨號：GX003

產(chǎn)品介紹

中性蛋白酶，也稱為分散酶，是一種非特異性的金屬蛋白酶，被用來從各種不同組織或器官中消化細胞外基質(zhì)，釋放并制備原代單細胞；或用于細胞培養(yǎng)中的細胞收獲或接種轉(zhuǎn)移；也被用于防止懸浮細胞培養(yǎng)時的細胞意外結(jié)團。蛋白水解酶類，如胰蛋白酶、膠原酶和鏈酶蛋白酶都被用語來分散組織、分類細胞，但他們常傷害細胞，并且在培養(yǎng)時不穩(wěn)定，甚至可能引入支原體污染。Dispase就沒有這個問題，不會給細胞膜帶來傷害，而且因為其來自細菌，故不會引入支原體或任何動物病毒；溫度、pH、血清成分等的差異對Dispase影響很小。Dispase經(jīng)稀釋后其活性就大大降低，這也方便了后續(xù)的培養(yǎng)。Dispase甚至被加入細胞培養(yǎng)懸液中用于防止細胞團結(jié)。

1、優(yōu)勢： 該酶已被證實作用迅速有效又溫和； 細胞能保持完整，細胞膜無損；

2、該酶非哺乳動物來源，不含支原體或動物病毒污染；

3、對于溫度、pH的改變、以及血清成分都很穩(wěn)定； 

4、使用螯合劑或稀釋就能簡單滅活；酶編號：EC 3.4.24.4 酶活定義：

5、1U是在檢測條件下1分釋放相當(dāng)于1 umol酪氨酸的Folin陽性氨基酸或肽的酶量；DispaseII：≥0.8 U/mg (37℃，使用酪蛋白作為底物，pH 7.5)；

6、1U Dispase II基本相當(dāng)于600U日本單位的Dispase；

7、抑制劑： EDTA、EGTA、Hg2+、其他重金屬。血清不會抑制酶活性。 

使用方法

用Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)溶解Dispase至10 mg/ml，使用時用細胞培養(yǎng)液稀釋到0.6-2.4 U/ml。不推薦高于2.4 U/ml的 工作濃度，可用0.22 um的無菌濾膜過濾除菌。 

保存方法

保存在 2℃~8℃；配成溶液后，在 2℃~8℃ 環(huán)境內(nèi) 2周內(nèi)使用有效，在-20 ℃ 2個月內(nèi)使用有效；不要反復(fù)凍融；儲存液用Hepes鹽緩沖液稀釋后，2℃~8℃，3天內(nèi)使用有效。